Наборы и реагенты
Cat. No. / ID: 55114
Состав набора:
Для 50 препаратов: колонки QIAamp Mini, удлинители пробирок (20 мл), протеиназа K QIAGEN, РНК-носитель, буферы, вакуумные коннекторы и пробирки для сбора образцов (1,5 мл и 2 мл)
Для выделения свободно циркулирующей ДНК и РНК из плазмы или сыворотки человека.
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit предназначен для молекулярно-биологических приложений. Этот продукт не предназначен для диагностики, профилактики или лечения заболеваний.
Характеристики
Описание
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit значительно упрощает концентрацию и очистку свободно циркулирующих ДНК и РНК из плазмы или сыворотки.
Комплект можно автоматизировать на QIAcube Connect.
Производительность
Анализ фрагментов внеклеточной ДНК, специфичных для опухоли, и мРНК в крови может обеспечить специфическое обнаружение типов опухолей из простого образца крови. Эти циркулирующие нуклеиновые кислоты присутствуют в сыворотке или плазме, как правило, в виде коротких фрагментов, <1000 п.н. (ДНК) или <1000 нт (РНК). Кроме того, микроРНК, размером всего 21 нт, могут быть биомаркерами для определенных видов рака и болезненных состояний.
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid обеспечивает эффективную очистку этих циркулирующих нуклеиновых кислот из человеческой плазмы или сыворотки и других бесклеточных жидкостей организма. Эффективная очистка с воспроизводимыми выходами обеспечивает репрезентативную популяцию циркулирующих нуклеиновых кислот в крови. Удлинители пробирок и вакуумная обработка на QIAvac 24 Plus позволяют использовать исходные объемы образцов до 5 мл, а гибкие объемы элюирования от 20 мкл до 150 мкл позволяют концентрировать виды нуклеиновых кислот, присутствующие в низких концентрациях. Набор обеспечивает передовую технологию селективного связывания с мембраной на основе кремния для улучшенного восстановления фрагментированных нуклеиновых кислот.
Очистка циркулирующей РНК без соочистки ДНК возможна при расщеплении ДНК с использованием набора ДНКазы без РНКазы. Специализированный протокол обеспечивает высокоэффективную очистку малых РНК, таких как микроРНК. Метилированную ДНК можно эффективно очистить с помощью набора QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit. Очищенная ДНК сохраняет свое метилирование, что позволяет проводить бисульфитную конверсию для анализа состояния метилирования.
Очищенная и концентрированная циркулирующая ДНК и РНК не содержит белков, нуклеаз и других примесей и готова к использованию в широком спектре последующих приложений, включая:
Принцип
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid упрощает выделение циркулирующей ДНК и РНК из плазмы или сыворотки. Не требуется экстракция фенолом-хлороформом. Нуклеиновые кислоты специфически связываются с колонкой QIAamp Mini, в то время как загрязняющие вещества проходят через нее. Ингибиторы ПЦР, такие как двухвалентные катионы и белки, полностью удаляются за 3 этапа промывки, оставляя чистые нуклеиновые кислоты для элюирования в буфере, поставляемом с набором. Технология QIAamp Circulating Nucleic Acid позволяет получать циркулирующую ДНК и РНК из плазмы, сыворотки или мочи человека.
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid сочетает селективные связывающие свойства мембраны на основе кремния с гибкими объемами элюирования от 20 до 150 мкл. Циркулирующая РНК может быть очищена с помощью расщепления ДНК с использованием набора RNase-Free DNase.
Процедура
Процедура QIAamp Circulating Nucleic Acid включает 4 этапа (лиз, связывание, промывка и элюирование), которые выполняются с использованием колонок QIAamp Mini на вакуумном коллекторе. Простая процедура отлично подходит для одновременной обработки нескольких образцов, обеспечивая получение нуклеиновых кислот менее чем за 2 часа на 24 образца. Если набор QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit используется для выделения вирусной РНК и ДНК, производительность не может быть гарантирована для каждого вида вируса и должна быть проверена пользователем.
Область применения
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit эффективно очищает и концентрирует свободно циркулирующие ДНК, РНК, микроРНК и вирусные нуклеиновые кислоты из исходных материалов, которые содержат низкие концентрации в основном фрагментированной ДНК и РНК (обычно 1–100 нг/мл циркулирующей ДНК в плазме человека). Начальные объемы образцов могут составлять до 5 мл.
Набор QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit очищает и концентрирует нуклеиновые кислоты из следующих типов образцов:
Технические характеристики
Функции | Технические характеристики |
Приложения | ПЦР, ПЦР в реальном времени |
Объем элюирования | 20–150 мкл |
Формат | Мини-колонки QIAamp |
Основной тип образца | Сыворотка, плазма |
Обработка | Ручной (вакуумный) |
Технология | Silica technology |
Очистка общей РНК, микроРНК, поли А+ мРНК, ДНК или белка | Свободно циркулирующие ДНК, РНК и микроРНК, вирусная ДНК, вирусная РНК |
Образец количество | 1-5 мл |
Объем элюирования | 20–150 мкл |
Время на запуск или на подготовку | <2 часа на 24 приготовления |
Выход | Варьируется из-за различий между донорами и статуса заболевания |