Наборы и реагенты
Cat. No. / ID: 51106
Состав набора:
Для 250 минипрепаратов ДНК: 250 мини-спин-колонок QIAamp, протеаза QIAGEN, реагенты, буферы, пробирки для сбора (2 мл)
Для очистки геномной, митохондриальной или вирусной ДНК из крови и других жидкостей организма
Наборы QIAamp DNA Blood Kits предназначены для молекулярно-биологических приложений. Эти продукты не предназначены для диагностики, профилактики или лечения заболеваний.
Характеристики
Описание
Наборы QIAamp DNA Blood обеспечивают очистку ДНК на основе кремниевой мембраны из цельной крови, плазмы, сыворотки и других жидкостей организма. Наборы предназначены для образцов объемом от 200 мкл до 10 мл свежей или замороженной цельной крови человека. Спин-колонки QIAamp можно легко обрабатывать в центрифуге или на вакуумных коллекторах. Удобный 96-луночный формат с использованием центрифугирования позволяет очищать ДНК для лабораторий, которым требуется высокопроизводительная очистка ДНК из крови, лейкоцитарно-слоистого слоя, плазмы, сыворотки, костного мозга, лимфоцитов и жидкостей организма. Также доступен специальный набор для автоматизированной очистки 1–12 образцов на QIAcube Connect.
Производительность
Наборы для анализа крови QIAamp DNA позволяют получить ДНК размером от 200 п.н. до 50 к.п.н. в зависимости от возраста и условий хранения образцов. Очищенная ДНК подходит для амплификации методом ПЦР на большие расстояния и анализ полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ), используемые, например, для проверки отцовства.
Набор QIAamp DNA Blood Midi обеспечивает восстановление ДНК до 94,5%; набор QIAamp DNA Blood Maxi обеспечивает восстановление ДНК до 95,8% в зависимости от исходной плотности клеток (см. таблицу «Выход ДНК из цельной крови человека с различной плотностью клеток»).
Выход ДНК из цельной крови человека с различной плотностью клеток
|
Лейкоциты на мл |
Выход ДНК (мкг) |
Восстановление ДНК (%) |
||
|
|
QIAamp Midi |
QIAamp Макси |
QIAamp Midi |
QIAamp Макси |
|
2,5 х 105 |
3.0 |
15.8 |
92.3 |
95,8 |
|
1,0 х 106 |
11.0 |
60.4 |
91.7 |
91,5 |
|
5,0 х 106 |
62.4 |
312.0 |
94,5 |
94,5 |
|
1,0 х 107 |
116.3 |
624.6 |
88.1 |
94,6 |
Геномную ДНК очищали из 2 мл (QIAamp Midi) или 10 мл (QIAamp Maxi) цельной крови человека и элюировали в 300 мкл (Midi) или 1 мл (Maxi) буфера для элюирования. Первый элюат загружали в колонку второй раз и снова центрифугировали (т.е. повторно элюировали). Процент восстановления ДНК рассчитывали, предполагая, что один лейкоцит содержит 6,6 пг ДНК.
Набор для анализа крови ДНК QIAamp 96 обрабатывает образцы объемом до 200 мкл, при этом время подготовки 192 образцов составляет от двух до трех часов, что позволяет получить высокочистую ДНК менее чем за одну минуту на подготовку. Еще более высокую производительность можно получить, разбив процедуру на этапы. Планшеты QIAamp 96 обеспечивают однородность восстановления и чистоты ДНК от лунки к лунке. Типичный выход составляет 6 мкг на 200 мкл здоровой цельной крови при объеме элюирования 50–200 мкл.
Специальный набор QIAamp DNA Blood Mini QIAcube обеспечивает автоматическую изоляцию ДНК из крови и изоляцию ДНК из биологических жидкостей на QIAcube Connect . В комплект входят адаптеры ротора, которые предварительно загружены спин-колонками QIAamp и элюционными трубками, что обеспечивает большее удобство и экономию времени. Кроме того, повышается простота использования и сводятся к минимуму ошибки пользователя. Отходы сокращаются, поскольку содержимое специального набора специально разработано для очистки на QIAcube Connect, а лишние трубки, необходимые для ручной процедуры, не включены.
При использовании автоматизированного набора QIAamp DNA Blood Mini Kit на QIAcube Connect наборы QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set A и QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set B обеспечивают удобство дополнительных буферов и реагентов для автоматизированной подготовки образцов.
Принцип
Не требуется экстракция фенолом-хлороформом. ДНК специфически связывается с силикагелевой мембраной QIAamp, в то время как загрязняющие вещества проходят через нее. Ингибиторы ПЦР, такие как двухвалентные катионы и белки, полностью удаляются за два эффективных этапа промывки, оставляя чистую нуклеиновую кислоту для элюирования либо водой, либо буфером, поставляемым с набором. Технология ДНК-крови QIAamp позволяет получать геномную, митохондриальную или вирусную ДНК из крови и родственных жидкостей организма, готовую к использованию в процедурах ПЦР и блоттинга. Технология подготовки образцов QIAamp полностью лицензирована.
Процедура
Наборы для выделения ДНК из крови QIAamp DNA упрощают очистку ДНК из крови и очистку ДНК из биологических жидкостей с помощью быстрой спин-колонки, вакуума, центрифугирования или автоматизированных процедур. Можно обрабатывать свежую и замороженную цельную кровь с обычными антикоагулянтами, такими как цитрат, ЭДТА и гепарин. При обработке спин-колонок QIAamp Midi или Maxi на вакуумных коллекторах требуются дополнительные буфер AW1 [кат. № 19081] и буфер AW2 [кат. № 19072] для использования с вакуумными коллекторами.
Вакуумная обработка с помощью набора QIAamp DNA Blood Mini Kit
С набором QIAamp DNA Blood Mini Kit кровь можно обрабатывать вакуумом вместо центрифугирования, что обеспечивает большую скорость и удобство очистки ДНК. Спиновые колонки QIAamp mini размещаются на коллекторе QIAvac 24 с помощью клапанов VacValves и коннекторов VacConnectors. Клапаны VacValves следует использовать, если скорости потока образцов значительно различаются, чтобы обеспечить постоянный вакуум. Одноразовые коннекторы VacConnectors используются для предотвращения перекрестного загрязнения. Использование коннекторов VacConnectors также позволяет выполнять эти процедуры центрифугирования QIAamp на QIAvac 6S с адаптерами QIAvac Luer.
Автоматизированная обработка на QIAcube Connect
Отмеченный наградами QIAcube Connect использует передовую технологию для обработки спин-колонок QIAGEN, что позволяет бесшовно интегрировать автоматизированную подготовку образцов с низкой пропускной способностью в лабораторные рабочие процессы. Все этапы процедуры очистки полностью автоматизированы — за один запуск можно обработать до 12 образцов. QIAcube Connect, используемый вместе со специальным набором QIAamp DNA Mini QIAcube, обеспечивает выигрышную комбинацию для быстрой, простой и удобной очистки ДНК.
Высокопроизводительная обработка в 96-луночном формате
Для процедуры центрифугирования QIAamp 96 требуются глубокие роторные ведра системы центрифугирования QIAGEN 96-Well-Plate для размещения планшетов QIAamp 96, установленных на 96-луночных блоках. Можно использовать свежую или замороженную цельную кровь, обработанную обычными антикоагулянтами, такими как ЭДТА, цитрат и гепарин. Сухую цельную кровь можно обрабатывать с помощью дополнительного оборудования и специального протокола, который можно получить в технической службе QIAGEN или у вашего местного дистрибьютора.
Область применения
Наборы QIAamp DNA Blood Kits предоставляют проверенную технологию QIAamp для очистки ДНК из различных материалов. Источники образцов включают:
Сравнение наборов ДНК-крови QIAamp
Функции | Мини-набор для анализа крови QIAamp DNA | Набор QIAamp DNA Blood Midi | Набор для анализа крови ДНК QIAamp 96 |
Приложения | ПЦР, ПЦР дальнего действия, Саузерн-блоттинг | ПЦР, Саузерн-блоттинг | Саузерн-блоттинг, картирование генома |
Объем элюирования | 50–200 мкл | 100–400 мкл | 50–200 мкл |
Формат | Спиновая колонка | Спиновая колонка | 96-луночный планшет |
Основной тип образца | Цельная кровь, жидкости организма | Цельная кровь, жидкости организмаЦельная кровь | Цельная кровь, жидкости организма |
Обработка | Ручной (центрифугирование или вакуум) | Ручной (центрифугирование или вакуум) | Ручной (центрифугирование или вакуум) |
Очистка общей РНК, микроРНК, | Геномная ДНК, митохондриальная ДНК, вирусная ДНК | Геномная ДНК, митохондриальная ДНК, вирусная ДНК | Геномная ДНК, митохондриальная ДНК, вирусная ДНК |
Образец количество | 1–200 мкл | 0,3–2 мл | <200 мкл |
Технологии | Silica technology | Silica technology | Silica technology |
Время на запуск или на подготовку | 20–40 минут | 55 минут | 2–3 часа (192 образца) |
Выход | 4–12 мкг | 20–60 мкг | 6 мкг |